고정에 관해 덧붙임

• 중성포르말린 액 제조법

포르말린 원액(보통 37~40%)--- 1리터

증류수 ----------------------- 9리터

Sodium phosphate monobasic--4그램

Sodium phosphate dibasic----6.5그램

----------------------------------------통상 중성이 되므로 흔히 실험실에서 많이 쓰이지요.

• 고정액의 양

보통 조직양의 10배내지 20배가 적당합니다. 좋은 조직을 얻기 위해서라면 고정액을 아까워하지 마십시오.

반드시 고정액에 넣기 전에 생리식염수로 충분히 세포부스러기와 혈액을 씻어 내야 됩니다.

• 고정액의 침투정도 : 대개 1시간에 1mm정도 침투한다고 합니다.
• 고정에 적당한 조직의 두께는?

조직이 얇을 수록 고정이 잘됩니다. 고정이 되면 조직의 바깥쪽은 조직내부로의 고정액 침투를 방해하는 방벽역할을 하므로 조직의 두께는 4밀리미터를 넘지 않는 것이 좋습니다.

• 고정시간

일반적인 포르말린 고정액을 사용할 경우 적어도 하루는 고정을 시켜야 합니다. 전 한 2,3일은 푹 담가 두죠...^^**

예외) zenker 고정액의 경우는 12시간이 지나면 너무 단단해 집니다. carnoy액의 경우는 6시간이 지나면 수축이 일어나므로 조심해야 합니다.

• 고정할때의 온도

대개의 고정은 실온에서 이루어 집니다. 보통 겨울에는 온도가 낮아 오랜시간을 두어도 고정이 되지 않습니다. 이럴때 흔히 쓰는 방법은 파라핀 오븐에 넣어두면 빨리 고정되더군요. Tip!!! 고정을 할때 4mm두께로 잘라 직접 고정을 시키는 사람들이 있는데, 그러면 조직이 뒤틀어져 포매할때 별로 좋지 않습니다. 그럴때는 조직을 어느정도 두께로 잘라 고정시킨후 그것을 다시 4mm두께로 자릅니다.(우리는 이걸 trimming이라고 부릅니다.)그 다음에 다시 고정을 시키지요. 그럼 뒤틀리지 않습니다.

• 고정후 조직의 용적 변화는?

본래 조직보다는 단단해지므로 용적이 줄어들더군요. 이후 조직처리과정을 거치면 33%까지 줄어든다는 보고도 있습니다. (Baker et al)

• 그 외의 고정방법으로는?

전자렌지를 사용하든지, 다른 고정액을 사용할 수도 있습니다. 하지만 흔히 쓰이지는 않으며, 학술용으로는 연구되고 있습니다.

• 참고문헌

1. 병리조직 검사학, 고문사, 이재택 외 4인, 1995

2. 조직 기술학

3. 실험노트